重组人源化胶原蛋白原材料评价指导原则（四）

本期内容围绕重组人源化胶原蛋白原材料的杂质污染物与添加剂评价展开，重点涵盖工艺相关杂质、外源性污染物及培养剂残留的检测要求。
工艺相关杂质研究
需对宿主细胞来源的蛋白质、DNA、多糖及病毒等工艺杂质进行鉴别与定量分析。宿主细胞蛋白检测需采用高灵敏度的免疫检测法，并利用不含胶原蛋白基因的对照细胞验证抗体特异性。宿主DNA残留分析通过标记实验验证纯化工艺的有效性，并依据中国药典要求选择荧光染色法或定量PCR法测定外源DNA残留量，根据临床使用量设定残留限量。
外源性污染物控制
粗盐性污染物如钛聚糖需通过经验证的方法或市售试剂盒检测，结合热原风险设定限量。碳水化合物结构需分析中性糖、氨基糖、唾液酸含量及糖基化位点，确保糖蛋白结构的稳定性。
培养剂残留评估
针对培养剂中的诱导剂、抗生素等组分，需测定残余抗生素含量与活性。抗生素残留测定标准参考YY/T1849方法，活性检测采用中国药典抗生素微生物检定法，确保无残留活性。CHO细胞蛋白残留可通过酶联免疫试剂盒检测，菌体蛋白残留则依据大肠杆菌或酵母工程菌测定法进行定量。
风险与限量设定
所有残留物的限量需结合医疗器械临床用途、最大使用量及生物制品相关标准综合制定，重点关注宿主类型与DNA/蛋白残留的风险等级，确保材料的安全性与功能性。